Vanessa Evelyn Ibacache Maldonado; Claudia Uscamayta Checa; Jose Carlos Chalco Ordoã±Ez; Renzo Sadath Salazar Sanchez; Fernando Steve Segovia Cruz; Jorge Andres Ballon Echegaray; Ada Otilia Del Carpio Sanz

http://proyectos-vri.unsa.edu.pe/handle/91.103.221022/7076

Objetivo

Estandarizar e implementar la técnica MALDITOF (Matrix-assisted laser desorption/ionization-Time of Flight) como método de diagnóstico sencillo, confiable y de bajo costo en la identificación parasitológica Blastocystis sp. en la ciudad de Arequipa.

Resumen:

Las parasitosis intestinales constituyen uno de los principales problemas de salud pública en el Perú, debido principalmente a la falta de disponibilidad de agua potable y adecuadas condiciones de saneamiento en diferentes regiones del país. El protozoo intestinal Blastocystis sp. es uno los más comunes y ampliamente distribuido a nivel mundial, encontrado en el tracto intestinal de humanos y animales. En Arequipa las prevalencia reportada varía en un rango entre 36.13% y 71.91% . Las técnica de diagnóstico utilizada para identificar a Blastocystis sp. es mediante microscopia de campo claro, que requiere personal entrenado en la identificación de las diferentes formas en que se presenta el parásito en muestras de heces, por lo que hace que tenga un elevado nivel de imprecisión y baja confiabilidad . Así mismo las técnicas moleculares empleadas actualmente son muy sofisticadas y están basadas en la identificación genómica por medio de PCR y secuenciamiento, técnicas de elevado costo y no accesibles para un diagnostico rutinario, siendo necesaria la búsqueda de otros medios de diagnóstico que sean precisos y confiables, menos costosos y que requieran menor entrenamiento para su utilización efectiva y además que sean capaces de poder determinar la presencia de los subtipos genéticos del parásito (relacionados con la patogenicidad). En tal sentido, es de vital importancia desarrollar herramientas de diagnóstico más precisas para Blastocystis sp. El presente proyecto se enfoca en el desarrollo y adaptación de la técnica MALDI-TOF para ser utilizada como método de diagnóstico de subtipos genéticos de Blastocystis sp. para brindar una identificación adecuado y precisa como apoyo al diagnóstico y tratamiento del paciente.

Palabras clave

Blastocystis, MALDI-TOF, diagnóstico molecular, perfiles proteicos, Arequipa, UNSA

Problema central

Las parasitosis intestinales constituyen uno de los principales problemas de salud pública alrededor del mundo y están relacionadas con las características sanitarias y geográficas del lugar. El Perú es uno de los países afectados por infecciones intestinales debido principalmente a la falta de disponibilidad de agua potable y adecuadas condiciones de saneamiento en diferentes regiones del país. Blastocystis sp. es uno de los protozoos intestinales más comunes y ampliamente distribuidos a nivel mundial y con elevada prevalencia en Perú. Está presente en el tracto intestinal de humanos y animales, se caracteriza por ser una especie con mucha variabilidad genética. Dicha variabilidad genera un panorama ambiguo en cuanto a su patogenicidad para el ser humano. Actualmente es considerado como un patógeno emergente y de potencial zoonótico, sin embargo aún existen muchos aspectos de este parásito que quedan por dilucidar. Las técnica de diagnóstico utilizada para identificar Blastocystis sp. es microscopia de campo claro, siendo imprecisa debido a la variedad morfológica del parásito, así mismo las técnicas moleculares empleadas actualmente son complejas y costosas, como la identificación del ADN por medio de PCR y secuenciamiento genético. De acuerdo a lo antes expuesto, el principal problema identificado se enfoca en el hecho de que existe una deficiencia en los actuales métodos de diagnóstico utilizados para la determinación de parásitos con amplia variedad genética como Blastocystis sp.

Hipótesis planteada

Proyecto para desarrollo de procedimientos (no lleva hipótesis).

Resultados esperados

Como resultado de la investigación se espera tener:
- Estandarizar un método de diagnóstico de subtipos genéticos de Blastocystis sp. por medio de la técnica MALDI-TOF.

Así también, con el financiamiento otorgado se tendrá:
- 02 Artículos científicos aceptados para publicación en revistas indizadas en la base Scopus o Web of Science con filiación de los docentes y alumnos de la UNSA a la “Universidad Nacional de San Agustín de Arequipa”, uno relacionado al procedimiento propiamente dicho y otro relacionado a la sensibilidad, especificad, confiabilidad, valor predictivo positivo y valor predictivo negativo del método.
- 01 estudiante UNSA titulados con la opción de Tesis formato artículo, con publicación en revista indizada en bases Scopus o Web of Science, relacionado a la sensibilidad y confiabilidad del método.
- 02 ponencias internacionales de los resultados intermedios o finales de la investigación presentadas en eventos científicos de trascendencia.
- 01 ponencia nacional de los resultados intermedios o finales de la investigación presentadas en eventos científicos de trascendencia.
- 01 Registro de propiedad intelectual.

Impactos esperados

- A nivel social se podrá brindar un servicio específico a los pacientes diagnosticados con Blastocytosis.
- A nivel económico, con un diagnóstico específico, se podrá brindar un tratamiento adecuado de ser necesario, disminuyendo los costos de atención al paciente y a los sistemas de salud del país.
- A nivel ambiental, el desarrollo de una técnica precisa y con el uso de reactivos menos tóxicos para el ambiente permite reducir el impacto durante el procesamiento, con un menor uso de insumos.
- A nivel técnico, el desarrollo de nuevos métodos de diagnóstico de Blastocystis sp. más eficaces y
oportunos.